pTS HPTrx TOPO 表达载体,具有 Kanamycin 抗性,是在pET28a骨架基础上改造优化而成。载体N端融合HPTrx高促溶硫氧还蛋白标签与6×His序列,同时经 TOPO 拓扑异构酶修饰,可实现高效定向克隆与快速载体构建。其中HPTrx为野生型Trx经定点突变改造的升级版硫氧还蛋白标签,通过特定位点氨基酸突变构建表面组氨酸补丁结构,在完全保留天然Trx折叠结构的前提下,进一步强化标签促溶能力与层析适配性;经典硫氧还蛋白Trx基础分子量为11.7 kDa,改造后的HPTrx标签延续了原标签超高表达特性,在大肠杆菌中表达时可占细胞总蛋白的40%,天然水溶性极强,融合表达后能显著改善困难蛋白、疏水蛋白及真核来源蛋白的折叠状态。
大量研究证实,Trx类硫氧还蛋白融合标签不仅能显著提升真核外源蛋白的翻译起始效率与整体表达量,还能高效抑制蛋白错误聚集与包涵体形成,大幅提升重组蛋白可溶性占比。本载体N端融合的HPTrx标签 + 6×His双亲和区域,可兼容镍柱IMAC亲和纯化,标签区域可通过TEV蛋白酶精准酶切切除,无痕释放天然目的蛋白;载体自带C端Strep tag II标签,特异性强、非特异结合低,且标签短小温和,通常不会干扰目的蛋白天然空间结构与生物活性,可用于二次高特异性亲和精制,有效去除杂蛋白与降解片段,进一步提升最终蛋白产物的纯度、均一性与应用稳定性。





