谷胱甘肽琼脂糖凝胶4FF具有吸附容量大、稳定性高、选择性好等优点,可以在非变性条件下对含有GST标签的重组蛋白进行纯化。具体特性见下表:
葡聚糖凝胶G-25树脂的特征参数
特征参数 | 指标 |
基质 | 交联葡聚糖 |
用途 | 脱盐、缓冲液更换、去除标记物分子 |
平均粒径 | 200 µm (100-300 µm) |
直径比(水合:干燥) | ~ 1.7 |
吸水量 | 约2.5 ml/g |
建议流速 | <150 cm/h |
最大耐受压力 | 0.08 MPa,0.8 bar |
储存溶剂 | 20%乙醇 |
pH稳定性 | 2-13 |
聚糖凝胶G-25最广泛的应用是进行缓冲液交换和脱盐等基团分离。当需要在色谱分析步骤之间改变样品的缓冲液组成时,通常需要更换缓冲液。样品脱盐通常在离子交换 (IEX) 和多模式色谱 (MMC) 之前,以及疏水作用 (HIC) 和亲和色谱 (AC) 之后以及分析之前进行。 例如,标记后需要净化小污染物,以便在分析前去除游离标记分子。在小规模上,使用葡聚糖凝胶G-25 的体积排阻色谱(SEC)已经取代了更慢、更繁琐的透析程序。
葡聚糖凝胶G-25树脂是通过右旋糖酐与环氧氯丙烷交联来制备的。葡聚糖凝胶G-25的主要用途是组分离,例如脱盐、缓冲液置换和样品净化。葡聚糖凝胶G-25树脂可以快速脱盐、去除污染物和缓冲液更换一步完成,具有出色的回收率和最低的样品稀释度,适用于工业应用的成熟树脂。
葡聚糖凝胶G-25树脂的“基团分离”是根据分子的相对大小来分离分子,使盐、游离标记分子和其他杂质等小分子与目标高分子量分子有效分离。在葡聚糖凝胶中,葡聚糖的交联程度决定了大分子可以渗透葡聚糖微球的程度,大分子被排除在外,而较小尺寸的分子根据其不同的大小在不同程度上进入葡聚糖微球。因此,大分子最先离开色谱柱,然后是小分子。
葡聚糖凝胶G-25可以对分子量(Mr)在 1000 至 5000范围内的球状蛋白进行分级分离,排除极限分子量约为5000。因此,分子量大于5000的蛋白质和肽很容易与分子量小于1000 的分子分离。可以使用重力流、离心、真空、蠕动泵或层析系统(如 ÄKTA™)手动进行分离。