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pNET GST TOPO表达载体

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pNET GST是在pET28a基础上构建,具有Kanamycin抗性。N端的GST融合标签有利于提高不同异源蛋白的翻译效率和促进可溶性表达,在一定程度上可以解决形成包涵体、表达量低、被蛋白酶降解等难题。整个连接反应仅需要5 min。

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pNET GST表达载体,具有Kanamycin抗性,是在pET28a基础上,在N端引入GST(Glutathione S-transferase)和多聚组氨酸序列,经TOPO拓扑异构酶修饰而成。GST是一种谷胱甘肽转移酶,分子量约26 kDa。GST是一种非常经典的融合表达标签之一,因在翻译过程中GST可快速折叠成稳定、可溶性的蛋白,广泛用于融合表达来提高重组蛋白的表达量和可溶性。同时,因GST可与谷胱甘肽(GSH)底物特异性的结合,广泛用于重组蛋白的纯化和检测。N端GST和多聚组氨酸序列可以通过PreScission protease切除,C端可以选择性的添加多聚组氨酸序列,一般不会对表达后蛋白质的性质产生影响,方便蛋白的纯化。

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