pNET MalE MBP TOPO表达载体

pNET MalE MBP表达载体，具有Kanamycin抗性，是在pET28a基础上，在N端引入malE基因所编码的完整的信号肽序列和MBP（Maltose-Binding Protein）序列，经TOPO拓扑异构酶修饰而成。MalE信号肽序列，可能将表达的蛋白运送到周质空间，广泛用于不宜在细胞质中正确折叠蛋白、需要形成正确二硫键进行折叠蛋白、分泌蛋白和跨膜蛋白等的表达。MBP是大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白，分子量约40 kDa，是经典的融合蛋白标签，应用广泛。MBP具有一定的伴侣蛋白作用，可以促进融合蛋白的折叠。同时，MBP 自身拥有较好的水溶性以及较高的表达量。更重要的是：MBP 可以和麦芽糖结合，通过Amylose亲和树脂，一步亲和纯化即可获得很高纯度的蛋白，麦芽糖底物竞争洗脱的条件也十分温和，有利于保持目标蛋白的活性。N端MBP序列可以通过PreScission protease切除，C端可以选择性的添加多聚组氨酸序列，一般不会对表达后蛋白质的性质产生影响，方便蛋白的纯化。