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pNET MBP TOPO表达载体

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pNET MBP是在pET28a基础上构建,具有Kanamycin抗性。N端的MBP融合标签有利于提高不同异源蛋白的翻译效率和促进可溶性表达,在一定程度上可以解决形成包涵体、表达量低、被蛋白酶降解等难题。

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pNET MBP表达载体,具有Kanamycin抗性,是在pET28a基础上,在N端引入多聚组氨酸序列和MBP(Maltose-Binding Protein)序列,经TOPO拓扑异构酶修饰而成。MBP是大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白,分子量约40 kDa,是经典的融合蛋白标签,应用广泛。MBP 具有一定的伴侣蛋白作用,可以促进融合蛋白的折叠。同时,MBP自身拥有较好的水溶性以及较高的表达量。更重要的是:MBP 可以和麦芽糖结合,通过Amylose亲和树脂,一步亲和纯化即可获得很高纯度的蛋白,麦芽糖底物竞争洗脱的条件也十分温和,有利于保持目标蛋白的活性。N端多聚组氨酸序列和MBP序列可以通过PreScission protease切除,C端可以选择性的添加多聚组氨酸序列,一般不会对表达后蛋白质的性质产生影响,方便蛋白的纯化。

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