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pNET NusA TOPO表达载体

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pNET NusA是在pET28a基础上构建,具有Kanamycin抗性。N端的NusA融合标签有利于提高不同异源蛋白的翻译效率和促进可溶性表达,在一定程度上可以解决形成包涵体、表达量低、被蛋白酶降解等难题。

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pNET NusA表达载体,具有Kanamycin抗性,是在pET28a基础上,在N端引入多聚组氨酸序列和大肠杆菌的NusA (N utilization substance A)蛋白序列,经TOPO拓扑异构酶修饰而成。大肠杆菌的NusA蛋白是一个抗转录终止因子,分子量约55 kDa。自身水溶性很好,同时又是大肠杆菌的内源蛋白,拥有极高的表达水平。研究表明,多种重组蛋白使用NusA 融合表达体系都获得了可溶性表达。N端多聚组氨酸序列和NusA蛋白序列可以通过PreScission protease切除,C端可以选择性的添加多聚组氨酸序列,一般不会对表达后蛋白质的性质产生影响,方便蛋白的纯化。

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