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pNET Trx TOPO表达载体

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pNET Trx 是在pET28a基础上构建,具有Kanamycin抗性。N端的Trx融合标签有利于提高不同异源蛋白的翻译效率和促进可溶性表达,在一定程度上可以解决形成包涵体、表达量低、被蛋白酶降解等难题。整个连接反应仅需要5 min。

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pNET Trx表达载体,具有Kanamycin抗性,是在pET28a基础上,在N端引入硫氧还蛋白Trx和多聚组氨酸序列,经TOPO拓扑异构酶修饰而成。硫氧还蛋白Trx分子量大小为11.7 kDa,在大肠杆菌中表达时可以达到细胞总蛋白的40%,并且保持很好的可溶性。一些研究报道表明,当作为融合标签时,硫氧还蛋白Trx可以增加某些真核蛋白的翻译效率,以及可溶性表达。N端Trx和多聚组氨酸序列可以通过PreScission protease切除,C端可以选择性的添加多聚组氨酸序列,一般不会对表达后蛋白质的性质产生影响,方便蛋白的纯化。

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