产品说明:
PreScission Protease是一种大肠杆菌中重组表达的带GST标签(Glutathione S-Transferase)的人鼻病毒14型的3C蛋白酶(human rhinovirus (HRV) type 14 3C protease),能在低温条件下(4°C)特异性地识别八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或核心五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切,常用于去除融合蛋白的Glutathione S-transferase (GST)、His或者其它标签的蛋白酶。
建议把GST或His等标签设计在融合蛋白的N端,在GST或His等标签与目的蛋白之间设计加入PreScission Protease 专一性识别与酶切的上述八肽序列,这样在GST或His标签被酶切后,在目的蛋白的N端仅有两个额外的Gly-Pro氨基酸残基,从而最大限度地减少了对其结构和功能的影响。
PreScission Protease带有GST标签,特别适合用于GST标签蛋白的在柱酶切。在切割GST标签蛋白的时候,切下的GST标签和PreScission Protease可结合于GST纯化柱(GST-tag Purification Resin)上,而目的蛋白在穿透液中,这样洗脱下来的蛋白中就不会含有GST标签和PreScission Protease,从而极大地方便了目的蛋白的纯化。
酶活性单位定义:在反应缓冲液中,5°C反应16小时,能够切割100 μg GST标签蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。