pTS CMB66 TOPO表达载体，具有Kanamycin抗性，是在pET28a骨架基础上改造优化而成。载体N端融合CMB66融合标签与6×His序列，同时经TOPO拓扑异构酶修饰，可实现高效定向克隆与快速载体构建。其中CMB66的全称为Carbohydrate-Binding Module Family 66（碳水化合物结合模块66家族），它是一种来源于枯草芽孢杆菌外切β-果糖苷酶Sacc的小分子高促溶融合标签，分子量约为12 kDa，其氨基酸序列富含柔性结构域与亲水性残基，天然水溶性优异，且空间构象灵活稳定，在完全保留自身折叠完整性的前提下，能高效结合并辅助外源蛋白正确折叠，显著提升难溶蛋白、疏水蛋白及真核外源蛋白的可溶性表达比例；CMB66标签在大肠杆菌中具有超高表达特性，表达时可占细胞总蛋白的36%以上，且表达产物不易形成包涵体，能在较广的温度范围内稳定维持可溶性状态。
大量研究证实，CMB66（Carbohydrate-Binding Module Family 66，碳水化合物结合模块66家族）融合标签不仅能显著提升真核外源蛋白的翻译起始效率与整体表达量，还能有效抑制蛋白错误聚集与包涵体形成，减少蛋白降解，大幅提升重组蛋白的可溶性占比与表达稳定性，尤其适合低温诱导表达体系、低表达及难折叠外源蛋白的表达优化。本载体N端融合的CMB66标签 + 6×His，可兼容镍柱IMAC亲和纯化，借助6×His与Ni²⁺的特异性结合实现融合蛋白的快速富集；标签区域可通过TEV蛋白酶精准酶切切除，酶切位点设计合理，能无痕释放天然目的蛋白，避免标签对目的蛋白结构、活性及后续实验的干扰；载体自带C端Strep tag II标签，特异性强、非特异结合低，且标签短小温和，通常不会干扰目的蛋白天然空间结构与生物活性，可用于二次高特异性亲和精制，有效去除杂蛋白、酶切残留标签及蛋白降解片段，进一步提升最终蛋白产物的纯度、均一性与应用稳定性。
