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pTS MalE MBP TOPO表达载体

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pTS MalE MBP TOPO是在pET28a基础上构建,具有Kanamycin抗性。N端的MalE MBP融合标签有利于提高不同异源蛋白的翻译效率和促进可溶性表达,在一定程度上可以解决形成包涵体、表达量低、被蛋白酶降解等难题。C端Strep‑tag II标签通常不影响目的蛋白的结构与功能,可用于高特异性亲和纯化,进一步提高最终产物的纯度与均一性。

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pTS MalE MBP TOPO表达载体,具有Kanamycin抗性,是在pET28a基础上,在N端引入malE基因所编码的完整的信号肽序列和MBP(Maltose-Binding Protein)标签、6×His序列,经TOPO拓扑异构酶修饰而成。MalE信号肽序列,可能将表达的蛋白运送到周质空间,广泛用于不宜在细胞质中正确折叠蛋白、需要形成正确二硫键进行折叠蛋白、分泌蛋白和跨膜蛋白等的表达。MBP是大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白,分子量约40 kDa,是经典的融合蛋白标签,应用广泛。MBP具有一定的伴侣蛋白作用,可以促进融合蛋白的折叠。同时,MBP自身拥有较好的水溶性以及较高的表达量,多聚组氨酸序列可与Ni²⁺亲和树脂特异性结合,为融合蛋白提供额外的亲和纯化选择,灵活适配不同实验的纯化需求。

更重要的是:MBP可以和麦芽糖结合,通过Amylose亲和树脂,一步亲和纯化即可获得很高纯度的蛋白,麦芽糖底物竞争洗脱的条件也十分温和,有利于保持目标蛋白的活性。N端MBP序列和6×His可以通TEV protease切除,载体本身C端Strep‑tag II标签通常不影响目的蛋白的结构与功能,可用于高特异性亲和纯化,进一步提高最终产物的纯度与均一性。

次数

10次, 20次, 50次

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