pTS NF8 TOPO 表达载体,具有 Kanamycin 抗性,是在pET28a骨架基础上改造优化而成。载体N端融合NF8高表达促溶卷曲螺旋标签与6×His序列,同时经TOPO拓扑异构酶修饰,可实现高效定向克隆与快速载体构建。其中NF8是中国科学院微生物研究所唐双焱团队开发的新型小型化五聚体卷曲螺旋融合标签,由大肠杆菌脂蛋白超螺旋五聚体F14经结构优化改造而成,分子量约8 kDa,兼具低分子量、高表达促溶与强稳定性等核心优势,是适配大肠杆菌表达体系的高效融合标签工具。NF8在完全保留自身紧凑折叠结构的前提下,进一步强化标签超高表达特性、抗蛋白酶降解能力与层析适配性;NF8 标签分子量小巧精简,相较于传统大分子量促溶标签更不易干扰目的蛋白天然折叠,改造后的 NF8 标签具备超强本底表达优势,在大肠杆菌中可实现高水平稳态表达,天然水溶性极强,融合表达后能显著改善困难蛋白、疏水蛋白、低表达真核来源蛋白的折叠状态与可溶性水平。
大量研究证实,NF8 类卷曲螺旋融合标签不仅能显著提升真核外源蛋白的翻译起始效率与整体表达量,还能高效抑制蛋白错误聚集与包涵体形成,大幅提升重组蛋白可溶性占比与胞内稳定性。本载体N端融合的NF8标签 + 6×His双亲和区域,可兼容镍柱IMAC亲和纯化,标签区域可通过TEV蛋白酶精准酶切切除,无痕释放天然目的蛋白;载体自带C端Strep tag II标签,特异性强、非特异结合低,且标签短小温和,通常不会干扰目的蛋白天然空间结构与生物活性,可用于二次高特异性亲和精制,有效去除杂蛋白与降解片段,进一步提升最终蛋白产物的纯度、均一性与应用稳定性。





